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[供應(yīng)]轉(zhuǎn)基因作物葉片蛋白濃度測定
- 產(chǎn)品產(chǎn)地：浙江省杭州市
- 產(chǎn)品品牌：托普云農(nóng)
- 包裝規(guī)格：Bt Cry1Ab/1Ac
- 產(chǎn)品數(shù)量：0
- 計量單位：盒
- 產(chǎn)品單價：0
- 更新日期：2016-11-21 09:20:19
- 有效期至：2016-12-22
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轉(zhuǎn)基因作物葉片蛋白濃度測定
詳細(xì)信息
產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因Bt Cry1Ab/1Ac 試劑盒
【原理】
本品系用特異性抗 Cry1Ab/1Ac 單抗包被的微孔板和酶標(biāo)記抗 Cry1Ab/1Ac 單抗，雙抗體夾心法檢測 Cry1Ab/1Ac 基因表達(dá)產(chǎn)物，可以高靈敏度和特異性的檢測轉(zhuǎn)基因植物中的 Bt-Cry1Ab/1Ac 蛋白。
【試劑盒組份（規(guī)格）】
預(yù)包被板（抗 Cry1Ab/1Ac 單抗） 12 孔×8
Cry1Ab/1Ac 酶標(biāo)抗體 12 ml×1 瓶
20×濃縮洗滌液 30 ml×1 瓶
5×抽提液/稀釋緩沖液 30 ml×1 瓶
底物液 A 7 ml×1 瓶
底物液 B 7 ml×1 瓶
終止液 7 ml×1 瓶
使用說明書 1 份
0ppb 陰性對照 1ml
4 個不同濃度的標(biāo)樣：
0.5 ppb 1.0 ppb 2.0 ppb 4.0 ppb 各 1ml
【試劑準(zhǔn)備】
試劑盒中的 20×濃縮洗滌液 30 ml 加 570 ml 滅菌 ddH2O 溶解稀釋至 1×洗滌液，5×抽提液（30 ml）加 120 ml ddH2O 稀釋至 1×抽提液，4℃存放備用。
【樣品準(zhǔn)備】
稱取約 20 mg 葉片，加 0.5 ml 1×抽提液（使用前 30 min 放置室溫）研磨至勻漿，室溫放置 30 min，測定前把樣品上清液稀釋 5-20 倍。
測定莖干和胚乳中的 Bt 蛋白時，樣品稱取約 40 mg，加 1 ml 1×抽提液研磨。
【ELISA 反應(yīng)】
1. 依次加 100 μl 陰性對照，標(biāo)準(zhǔn)品（4 個不同濃度的標(biāo)樣：0.5 ppb，1.0 ppb，2.0 ppb， 4.0 ppb）和待測樣品至 96 孔板；
2. 用封口膜蓋住 96 孔板，快速搖動平板混勻樣品；
3. 37℃恒溫箱孵育 30 min；
4. 倒掉 96 孔板中液體，每孔加入 1×洗滌液 250 μl 洗滌微孔板，洗板 5 次，用吸水紙拍干；
5. 按順序在每個小孔中加入 100 μl Cry1Ab/1Ac 酶標(biāo)抗體，然后重復(fù)步驟 2；
6. 37 ℃恒溫箱孵育 30 min；
7. 倒掉 96 孔板中液體，每孔加入 1×洗滌液 250 μl 洗滌微孔板，洗板 5 次，用吸水紙拍干；
8. 依次加入 50 μl 底物 A 液，50 μl 底物 B 液，重復(fù)步驟 2；
9. 室溫（20-25℃）避光孵育 10 min，加 50 μl 終止液，充分混勻終止反應(yīng)，15min 以內(nèi)在酶標(biāo)儀上讀取結(jié)果。 在 450 nm 為主波長，630 nm 為次波長（或單波長 450 nm）下，用空白孔校零，再讀取各孔 OD 值。
【注意事項】
1. 測定中需使用的所有試劑和 96 孔板提前 30 min 放置室溫溫育（否則會影響試驗準(zhǔn)確性），注意12 連管必須溫育后再從平板上取下，未使用完的預(yù)包被板條應(yīng)置于有干燥劑的封口袋中密封保存；
2. 試劑使用前應(yīng)充分搖勻；
3. 搖動平板混勻時注意避免樣品之間交叉污染；
4. 使用洗滌液漂洗時，洗滌液需要填滿每個小孔，進行充分漂洗；
5. 研磨好的樣品如果不能一次全部測量，可以暫時在 4 ℃避光保存，但是最好在 24 h 內(nèi)測定；
6. 結(jié)果判讀請在反應(yīng)終止后 15 min 內(nèi)完成。
【儲存條件及有效期】
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